VEPHOTON 疫熒光轉移標記試劑盒——NF-KAPPA B (NF-KB) - P65 (RELA) IMMUNOFLUORESCENCE LABELING KIT (NF-KAPPAB, NFKB-3)

VEPHOTON 疫熒光轉移標記試劑盒

• 提供NF-KPAPAB激活和P65轉位的視覺演示。

• 提供匹配的主要設備和2 ^O 熒光標記抗體,在細胞核和細胞質中檢測p65。

• 適用於大部分哺乳動物細胞(例如:人類,老鼠,老鼠,倉鼠,狗,兔子,馬。

• 通過用像素定量軟件測量P65的免疫熒光強度,對NF-KB激活進行量化。*

• 在40個顯微鏡幻燈片上給p65貼上標簽的充分解決方案。

背景

nf-kb復合體位于胞質中,處于非活性狀態(tài),由與P65-p50異二聚體組合的抑制性Ikb亞基組成。在刺激作用下,IKB抑制子單元被超基化和降解,暴露在P65(RELA)子單元上的核定位信號,然后轉移到原子核中。該試劑盒提供的抗體用于標記細胞核和胞質中的p65。然后利用熒光顯微鏡和像素量化軟件來估計P65的發(fā)射強度。

細胞生長在玻璃蓋上,約85%的共通性,并處理激活NF-KPAPAB。細胞蛋白首先是交聯的,并固定與甲醛(未提供)。交聯反應用提供的淬火溶液進行淬火。血漿和核膜是滲透性提供的溶液,其中包括滲透試劑和蛋白阻滯劑。  一個包括的P65IGG抗體,然后應用于細胞1小時。未綁定抗體被洗去,并提供羅丹明標記的FAB片段二級抗體應用1小時。未綁定的二次抗體被沖走,一個由滑塊和蓋片組成的三明治,中間有抗褪色溶液。安蒂法去溶液可以在一夜之間凝固。顯微鏡滑蓋滑塊配置現已準備好用于視覺和定量檢測P65易位。